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脂蛋白酯酶（LPL）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
| 貨號 | SH0482 | 售價（元） | 516 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0482 |
脂蛋白酯酶（LPL）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質(zhì)細胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。
測定原理：
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0482-50T/24S |
Storage |
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試劑一：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
10ml |
4℃避光 |
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試劑三：液體 |
25ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿。
樣品處理：
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清待測。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g離心10min，取上清待測。
3. 血清：直接測定。
測定操作：
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對照管 |
測定管 |
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樣品（μl） |
100 |
100 |
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試劑一（μl） |
400 |
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試劑二（μl） |
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400 |
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混勻，45℃水浴10min |
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試劑三（μl） |
500 |
500 |
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充分混勻，25℃靜置2min，于1ml玻璃比色皿，蒸餾水調(diào)零，測定400nm處吸光值，記為A對照管和A測定管，△A=A測定管- A對照管 |
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計算公式：
標準曲線：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982
1．按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每克組織每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性（μmol /min /g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷W
3．按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每104個細胞每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性（μmol /min /104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷細胞數(shù)量
4．按照液體體積計算
酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每毫升血清每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性（μmol /min /ml）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷V樣÷T
= 17.21×（△A+0.0169）
V反總：反應(yīng)總體積，1ml；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.1ml；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時間，10min
注意事項：
1. 試劑三加入混勻后靜置兩分鐘立即測定，否則影響吸光值。
2. 吸光值過高或者測定結(jié)果不穩(wěn)定，則將酶液進行適當(dāng)?shù)南♂?，并在計算公式中乘以稀釋倍?shù)。